2018年9月30日，CFDA批准了南京世和医疗器械有限公司申报的EGFR/ALK/ROS1/BRAF/KRAS/HER2基因突变检测试剂盒（可逆末端终止测序法）上市。南京世和医疗器械有限公司是世和基因实际控制的一家公司。
该试剂盒属于第三类医疗器械，用于定性检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者经福尔马林固定的石蜡包埋（FFPE）组织样本中EGFR、ALK、ROS1、BRAF、KRAS、HER2基因的多种变异。其中，EGFR基因19外显子缺失及L858R点突变用于吉非替尼片及盐酸埃克替尼片的伴随诊断检测，T790M点突变用于甲磺酸奥希替尼片的伴随诊断检测；ALK基因融合和ROS1基因融合用于克唑替尼胶囊的伴随诊断检测。该产品检测范围内的其他基因突变均未与靶向药物进行过安全性和有效性的联合临床试验评估，仅进行了性能验证，因此不能用于伴随诊断检测。
该试剂盒采用DNA探针捕获技术，首先对从NSCLC肿瘤FFPE样本中提取DNA进行片段化、加接头、PCR扩增等步骤制备文库，其后采用具有特定序列的DNA探针与文库进行杂交，从而特异性捕获来自人类基因组6种基因中的部分外显子与内含子区域，之后通过磁珠法富集被探针捕获的目标区域DNA片段。再对捕获富集后的文库进行定量与质控后，采用Illumina公司生产的MiSeqDx基因测序仪进行高通量测序。对于测序数据，采用生物信息学软件判读6种基因中是否存在来自肿瘤的变异。
该试剂盒的临床评价是在中国医学科学院附属肿瘤医院、南京医科大学第一附属医院(江苏省人民医院)、首都医科大学附属北京胸科医院共3家机构完成的。在中国医学科学院肿瘤医院及首都医科大学北京胸科医院2家临床机构开展与已上市或已充分联合药物临床评价的EGFR伴随诊断试剂的比较研究。与中国医学科学院附属肿瘤医院、南京医科大学第一附属医院（江苏省人民医院）、首都医科大学附属北京胸科医院共3家机构开展了ALK基因与伴随诊断试剂的比较研究。ROS1基因与伴随诊断试剂的比较研究在中国医学科学院肿瘤医院及首都医科大学北京胸科医院2家临床机构开展。
该试剂盒检测结果存在假阴性及假阳性的风险，主要包括：
1）检测过程主要包括DNA提取纯化、文库制备、探针杂交捕获、高通量测序及生物信息学分析等多个步骤多因素影响；
2）样本的来源、采集过程、样本质量及核酸提取质量等因素的影响；
3）产品研发阶段，配套提取试剂；
4）测序前实验操作、测序仪及数据分析软件等因素；
5）实验环境影响。比如涉及PCR扩增，操作过程中气溶胶泄露也可能会导致实验室污染；
6）非专业操作或操作不当的影响；
7）该产品阴性检测结果不能完全排除基因突变的存在。导致检测结果假阴性的原因可能包括：肿瘤样本中肿瘤细胞较少、肿瘤组织异质性、基因突变类型不在试剂盒检测范围内、突变比例低于试剂盒最低检测限、样本降解、样本污染、样本中存在过量干扰物质、不正确的样本保存、不正确的试剂盒保存、试剂盒过期、不恰当的实验操作等。
相关产品信息
2018年8月29日，天津诺禾致源生物信息科技有限公司，受理号ZDJ1600147，人EGFR基因T790M突变检测试剂盒（数字PCR法）
2018年7月23日，广州燃石医学检验所有限公司，受理号CSZ1700157，人EGFR/ALK/BRAF/KRAS基因突变联合检测试剂盒（可逆末端终止测序法）
2018年8月13日，天津诺禾致源生物信息科技有限公司，受理号CSZ1700089，人EGFR、KRAS、BRAF、PIK3CA、ALK、ROS1基因突变检测试剂盒（半导体测序法）
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http://samr.cfda.gov.cn/WS01/CL0403/236760.html
http://samr.cfda.gov.cn/WS01/CL0403/232552.html
https://www.cmde.org.cn/directory/web/WS01/images/MjIucGRm.pdf
https://www.cmde.org.cn/directory/web/WS01/images/zOXN4tXvtsK1LzBLnBkZg==.pdf
https://mp.weixin.qq.com/s?timestamp=1538366842&src=3&ver=1&signature=utQKTn4D5Nyz6Irg6CCGv17BPZoyubGQRZY0RbABYQ6Lw-wneIVweXsKKSTdabu1APjKbSjFOYorqDZlMKE6MmZB1IIZMjgWPv3ypM8yxvTLXkT4r8ObQt9oUilVPA2spKivHN4yqp0oq5LxL8LTzsvYFGI1DRAWHmYMOdtw1Co=